Amylase / macroamylase detection: Difference between revisions

Revision as of 00:52, 8 January 2022

Macroamylase and is the cause of 8–12% of cases of hyperamylase (increased values of total serum α-amylase). The cause is a macrocomplex of the enzyme with high molecular weight serum proteins, especially with immunoglobulins IgA and IgG. A similar macrocomplex is formed by other enzymes, such as pancreatic lipase. The α-amylase macroform can be determined by gel filtration, electrophoresis, PEG precipitation or ELISA. Quantitative determination of the enzyme macroform ratio is most accurate using gel permeation chromatography on Sephadex® G-100. The separation takes place in a refrigerated box at 10 ° C on a 9 × 150 mm column at a flow rate of 3 ml / hour for 5 hours. The α-amylase activity in the individual fractions is determined enzymatically by a standard procedure with pNP blocked maltoheptaoside and the result is the ratio of both forms of the enzyme.

An important aspect for the detection of the macroamylase complex is the instability of the complex with immunoglobulins. The complexes dissociate during serum freezing and thawing, so macroamylase must be detected in a freshly collected serum sample.

Reference values: The macroform of the enzyme is not present under physiological conditions. The test result is given as a percentage of the amylase macroform calculated from the activities of the individual fractions. A positive result, a proof of the complex, is therefore a value> 0.

Links

Source

with the permission of the author taken from KOCNA, Petr. GastroLab: MiniEncyclopedia of laboratory methods in gastroenterology [online]. © 2002. Last revision 2011-01-08, [cit. 2011-03-04]. <http://www1.lf1.cuni.cz/~kocna/glab/glency1.htm>.

Kategorie:Vložené články Kategorie:Biochemie Kategorie:Klinická biochemie Kategorie:Gastroenterologie

@@ Line 10: / Line 10: @@
 *
 * Toto upozornění se vkládá šablonou {{subst:Vložený článek}}
--------------------------------------------------------------------------------------------------------------->Makroamyláza a je příčinou 8–12 % případů hyperamylázemie (zvýšené hodnoty celkové sérové hladiny α-amylázy). Příčinou je makrokomplex enzymu s vysokomolekulárními proteiny séra, především s imunoglobuliny [[IgA]] a [[IgG]]. Obdobný makrokomplex tvoří i další enzymy a to např. pankreatická [[Lipáza makroenzym|lipáza]]. Makroformu α-amylázy lze stanovit [[Gelová permeační chromatografie|gelovou filtrací]], [[elektroforéza|elektroforeticky]], [[precipitace|precipitací]] s [[PEG]] nebo ELISA technikou. Kvantitativní stanovení poměru makroformy enzymu je nejpřesnější s použitím [[gelová chromatografie|gelové chromatografie]] na [[Sephadex G-100|Sephadexu&reg; G-100]]. Separace probíhá v chlazeném boxu při 10&nbsp;°C na koloně 9 × 150&nbsp;mm při průtoku 3&nbsp;ml/hod 5&nbsp;hodin. Aktivita α-amylázy je v jednotlivých frakcích stanovena enzymaticky standardním postupem s [[pNP blokovaný maltoheptaosid|pNP blokovaným maltoheptaosidem]] a výsledkem je poměr obou forem enzymu.
+-------------------------------------------------------------------------------------------------------------->Macroamylase and is the cause of 8–12% of cases of hyperamylase (increased values of total serum α-amylase). The cause is a macrocomplex of the enzyme with high molecular weight serum proteins, especially with immunoglobulins [[IgA]] and [[IgG]]. A similar macrocomplex is formed by other enzymes, such as pancreatic [[lipase]]. The α-amylase macroform can be determined by [[gel filtration]], [[electrophoresis]], [[PEG]] [[precipitation]] or ELISA. Quantitative determination of the enzyme macroform ratio is most accurate using [[gel permeation chromatography]] on [[Sephadex® G-100]]. The separation takes place in a refrigerated box at 10 ° C on a 9 × 150 mm column at a flow rate of 3 ml / hour for 5 hours. The α-amylase activity in the individual fractions is determined enzymatically by a standard procedure with [[pNP blocked maltoheptaoside]] and the result is the ratio of both forms of the enzyme.
-Důležitým aspektem pro průkaz makroamylázového komplexu je nestabilita komplexu s imunoglobuliny. Při zmražení a rozmražení séra dochází k disociaci komplexů, makroamylázu je proto nutné prokazovat v čerstvě odebraném vzorku séra.
+An important aspect for the detection of the macroamylase complex is the instability of the complex with immunoglobulins. The complexes dissociate during serum freezing and thawing, so macroamylase must be detected in a freshly collected serum sample.
-'''Referenční hodnoty:''' Makroforma enzymu není za fyziologických podmínek přítomna. Výsledek testu je udáván v procentuálním poměru makroformy amylázy vypočtené z aktivit jednotlivých frakcí. Pozitivní výsledek, průkaz komplexu, je tedy hodnota > 0.
+'''Reference values''': The macroform of the enzyme is not present under physiological conditions. The test result is given as a percentage of the amylase macroform calculated from the activities of the individual fractions. A positive result, a proof of the complex, is therefore a value> 0.<noinclude>
-<noinclude>
+== Links ==
-== Odkazy ==
+=== Related articles ===
-=== Související články ===
+* [[Amylase (definition)|Amylase]]
-* [[Amyláza]]
+=== Source ===
-=== Zdroj ===
+* with the permission of the author taken from KOCNA, Petr. GastroLab: MiniEncyclopedia of laboratory methods in gastroenterology [online]. © 2002. Last revision 2011-01-08, [cit. 2011-03-04]. <http://www1.lf1.cuni.cz/~kocna/glab/glency1.htm>.
-* se svolením autora převzato z {{Citace
-| typ = web
-| příjmení1 = Kocna
-| jméno1 = Petr
-| url = http://www1.lf1.cuni.cz/~kocna/glab/glency1.htm
-| název = GastroLab
-| podnázev = MiniEncyklopedie laboratorních metod v gastroenterologii
-| rok = 2002
-| datum_revize = 2011-01-08
-| citováno = 2011-03-04
-}}
 </noinclude>