Cerebrospinal fluid spectrophotometry

Under construction / Forgotten

This article was marked by its author as Under construction, but the last edit is older than 30 days. If you want to edit this page, please try to contact its author first (you fill find him in the history). Watch the discussion as well. If the author will not continue in work, remove the template {{Under construction}} and edit the page.

Last update: Tuesday, 15 Feb 2022 at 9.45 pm.

Spectrophotometry of cerebrospinal fluid sis used in the diagnosis of sudden strokes especially when suspecting subarachnoid hemorrhage. It is especially important for those cerebral hemorrhages that are difficult to prove by imaging methods. It is especially valuable in the early stages of the disease. Provides information on the age of bleeding and prolonged or repeated bleeding. Spectrophotometric examination of cerebrospinal fluid in the visible part of the spectrum allows characterization on the basis of different absorption maxima oxyhemoglobin (at 415 nm ), methemoglobin (at 405 nm) and bilirubin (at 420–460 nm).

At the beginning of cerebral hemorrhage, there is mainly oxyhemoglobin in the cerebrospinal fluid, later spectrophotometry shows the summing curve of oxyhemoglobin, or methemoglobin and bilirubin. Degree of degradation ofhemoglobin to bilirubin is highly variable individually. Isolated bilirubin xanthochromy appears at the earliest in 5 days.

Methods of determination

Cerebrospinal fluid spectrophotometry is performed on a registration spectrophotometer in the wavelength range 370-600 nm. For spectrophotometric examination, it is recommended to centrifuge the cerebrospinal fluid within 1 hour of collection.

Evaluation

Physiological findings

The spectrophotometric curve of cerebrospinal fluid under physiological conditions is flat or slightly elevated in the direction from 600 nm to 370 nm. In the visible region of the spectrum, the absorbances are less than 0.02.

Pathological findings

Demonstration of oxyhemoglobin

File:Oxy spectrophotometry.png

Img. 5: Oxyhemoglobin spectrophotometric curve (eg fresh subarachnoid hemorrhage - after a few hours)

Erythrocytes, which have penetrated the ventricles or subarachnoid space, begin to undergo hemolysis in about 2 hours, and the released hemoglobin conditions the formation of absorption maxima characteristic of oxyhemoglobin. The presence of oxyhemoglobin is manifested by an "absorption maximum at 415 nm" and "two smaller peaks at 540 and 575 nm." Its detection in cerebrospinal fluid is a sign of fresh bleeding into the brain. It reaches its maximum in 4-5 days and disappears after 7-10 days (Figs. 5, 6). The same curve can be obtained for an artificial blood admixture if the cerebrospinal fluid was not centrifuged in time after collection.

Průkaz methemoglobinu

Přítomnost methemoglobinu je známkou starších změn hemoglobinu. Maximum při 415 nm se posouvá směrem ke kratším vlnovým délkám s maximem při 406 nm. Nalézáme ho jako součást sumačních křivek, kde se absorbance jednotlivých pigmentů překrývají. Dá se však prokázat přídavkem KCN do vzorku. Pokud je přítomen methemoglobin, vznikne kyanmethemoglobin s absorpčním maximem v oblasti 419 nm; v případě, že se nevyskytuje, ke změně nedojde. Průkaz methemoglobinu ve směsi s oxyhemoglobinem potvrzuje, že příměs krve v moku je zapříčiněna mozkovým krvácením a nikoli arteficiální kontaminací při lumbální punkci.

Průkaz bilirubinu

Přítomnost bilirubinu v mozkomíšním moku svědčí pro starší krvácení do likvorových cest. Po hemolýze erytrocytů vzniká přeměnou hemoglobinu nekonjugovaný bilirubin s absorpčním maximem při 460 nm, tzv. long bilirubin. V likvoru se objevuje asi za 10–12 hodin po krvácení, maximum se zaznamenává 3. den a přetrvává 3–4 týdny. Typický spektrofotometrický záznam potvrzující subarachnoidální krvácení zachycuje křivku oxyhemoglobinu s hlavním vrcholem při 415& nm, na jehož sestupné straně je patrný další široký vrchol náležící bilirubinu (obr. 6). Postupně, jak pokračuje hemolýza erytrocytů, se poměr oxyhemoglobinu a bilirubinu snižuje. Bilirubin se může později v CSF konjugovat s volnými mastnými kyselinami a aminokyselinami. Konjugovaný bilirubin má absorpční maximum posunuto do oblasti 420 nm, tzv. short bilirubin. Spektrum samotného bilirubinu lze pozorovat nejdříve 5. den po subarachnoidálním krvácení (obr. 7).

V mozkomíšním moku je možno prokázat i bilirubin sérového původu. Do likvoru může pronikat fyziologicky u novorozenců nezralou hematoencefalickou bariérou, u dospělých porušenou hematoencefalickou bariérou nebo u výrazných ikterů. Konjugovaný bilirubin pochází většinou ze séra.

Odkazy

Související články

Externí odkazy

Použitá literatura

Kategorie:Biochemie Kategorie:Klinická biochemie Kategorie:Neurologie Kategorie:Infekční lékařství